非变性蛋白质质谱（native protein mass spectrometry）是一种用于研究蛋白质及其复合物在接近生理条件下的质谱分析技术。该技术重点在于保持蛋白质的天然构象和复合物的完整性，使得研究者能够在不破坏生物分子的情况下，研究它们的质量、结构和相互作用。

一、定义与原理

在传统的质谱分析中，样品通常会被强酸或高温处理，这往往导致蛋白质变性，继而无法提供有关其生物活性状态的信息。相比之下，非变性蛋白质质谱通过使用温和的电喷雾电离（ESI）技术，使蛋白质在接近生理条件下进入气相，最大程度地维持其天然状态。这一过程允许研究者直接分析蛋白质的质量、观察其构象变化以及研究蛋白质-蛋白质或蛋白质-配体之间的相互作用。

二、方法与技术步骤

1、样品制备

非变性蛋白质质谱中的样品准备至关重要。首先，蛋白质需要在远离变性剂的缓冲液中进行溶解。常用的溶剂包括挥发性盐溶液（如醋酸铵），以确保蛋白质的天然构象得以保持。

2、电喷雾电离（ESI）

此步骤是将溶液中的蛋白质转化为气相离子的关键。通过应用高电压，样品溶液被喷射成极其微小的液滴，随后溶剂蒸发，留下带电的蛋白质离子。这些离子在气相中保持其天然构象。

3、质谱分析

带电的蛋白质离子通过质量分析器进行测量。常用的质量分析器包括四极杆、离子阱和飞行时间（TOF）等。这些分析器可以区分不同质量的离子，从而识别蛋白质的质量和构象细节。

4、数据处理与分析

收集到的质谱数据将经过仔细的分析，以确定蛋白质的质量、构象以及可能的复合物结构。软件工具和算法的进步使得这一过程更加精准和高效。

三、应用与优势

非变性蛋白质质谱在多个研究领域中显示出强大的应用潜力。它为研究蛋白质复合物的结构和相互作用提供了宝贵的工具，尤其是在药物研发、蛋白质组学和结构生物学中。在药物研发中，通过分析蛋白质与小分子药物的结合状态，研究人员能够深入了解药物的作用机制。此外，这项技术在揭示多蛋白复合物的组装和解离序列方面也显示出显著优势。

四、挑战与未来展望

虽然非变性蛋白质质谱在研究蛋白质天然状态方面具有显著优势，但其应用仍然面临一些挑战。例如，分析大型和复杂蛋白质复合物的分辨率可能受到限制。此外，电喷雾电离效率和仪器灵敏度的提升依然是科研人员关注的重点。随着技术的不断进步，非变性质谱在生物科学研究中的应用前景将更加广阔。

通过保持蛋白质的天然构象，非变性蛋白质质谱在蛋白质研究领域中提供了前所未有的见解，推动了科学家对生物分子复杂行为的理解。

百泰派克生物科技特色项目

一、蛋白测序

百泰派克生物科技使用Thermo公司新推出的Obitrap Fusion Lumos质谱仪及岛津公司埃德曼降解测序系统对蛋白质序列进行分析，提供基于质谱的蛋白测序分析服务，包括对蛋白质的氨基酸组成分析，N端测序，C端测序和全序列分析，以及基于埃德曼降解的蛋白质N端序列分析服务。对于未知理论序列的蛋白质，提供基于从头测序法的蛋白质从头测序服务，对蛋白序列进行分析。

※服务优势：

1.采用目前世界上先进的质谱仪器 Obitrap Fusion Lumos;

2.可实现对所测定靶蛋白序列 100% 的覆盖;

3.可测定蛋白N端多达 70个氨基酸序列;

4.可测定多种形式的样品: 蛋白溶液、PVDF 蛋白条带;

5.样品用量低: 蛋白样品仅需 5-10ug，即可完成检测;

6.测序不受N端封闭，PEC和和糖基化等N端修饰的影响。

二、蛋白质组学

百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Orbitrap Fusion Lumos质谱平台结合Nano-LC，提供定量蛋白质组学、靶向蛋白质组学、多肽组学、翻译后修饰蛋白组学等多种蛋白质组学分析服务。此外，百泰派克生物科技新推出基于timsTOF Pro的4D蛋白质组学服务，助力微量样本蛋白组学、大样本群医学及高通量修饰组学等研究工作。

※服务优势：

1 .高通量定量蛋白分析:多对照组大规模实验分析，发现新的生物标记物;

2.体内体外多种蛋白质标记方法，适用于分析组织、细胞、血液等多种样品;

3.质谱分析灵敏度高，实验结果重复度高;

4.可检测较低丰度蛋白，线性范围广;

5.专业生物信息学分析，分析更系统准确。

三、单细胞质谱流式技术分析

百泰派克生物科技采用Fluidigm质谱流式系统进行单细胞质谱流式技术分析，采用金属元素标记物（通常是金属元素标记的特异抗体）标记细胞表面和内部的分子，然后用流式细胞原理分离单个细胞，再用电感耦合等离子体质谱（ICP-MS）分析单个细胞的原子质量谱，最后将原子质量谱数据转换为细胞表面和内部的信号分子表达量。

※服务优势：

1.技术先进，填补技术空白

采用金属标记抗体技术，避免了传统流式荧光通道少且易相互影响的问题。可在单细胞层面上对多种指标同时进行表征，百泰派克生物科技可做到同时检测51个目标蛋白。

2.分析数量大，成本较低

单细胞RNAseq受成本等因素限制，所有样本细胞汇总的分析数目一般在2x10^4个左右，而流式质谱技术一次（单样本）就可分析至少10^5的细胞，实现了数量级的提高，且成本不高于单细胞RNAseq。

3.应用前景大

①流式质谱结果可以给出细胞亚群的变化，在临床诊断、疾病机制研究等方面具有极大的研究前景；

②将金属标签技术与其他技术结合会有新应用方向。除常规蛋白外，质谱流式细胞技术还可用于蛋白翻译后修饰；

③可检测细胞存活率、细胞大小、mRNA转录子表达量、DNA合成速率以及蛋白酶活性等。

四、基于高精度质谱的免疫多肽组学分析及新抗原发现

百泰派克生物科技的基于高精度质谱的免疫多肽组学分析及新抗原发现一站式解决方案包括我们专有的、高度敏感的免疫肽富集和鉴定方案。我们能够帮助您实现10,000个以上I型多肽和10,000个以上II型多肽的鉴定和识别。通过我们优化的高通量免疫多肽组学分析平台进行免疫肽组学分析，可从最小的样品材料中进行可重复的识别和定量。该服务可以应用于大规模的研究，旨在助力科研工作者寻找癌症、免疫疾病及传染病的解决方案，深入挖掘未知的靶标。

五、生物药物表征

百泰派克基于高分辨率质谱技术，MALDI TOF，高效色谱分离技术，提供一系列完善的生物药物分析方案，从蛋白质、多肽、抗体、疫苗等生物制品的氨基酸组成和一级结构分析，到产品变异性和纯度分析。旨在提供优质生物药物分析服务，帮助生物医药生产商提高生物药物品质。

百泰派克生物科技七大检测平台

百泰派克生物科技-生物制品表征，生物质谱多组学优质服务商

北京百泰派克生物科技有限公司致力于为生物/制药和医疗器械行业提供质量控制检测和项目验证等专业服务。公司实验室遵循NMPA、ICH、FDA和EMA等的法规和指导原则，通过CNAS/ISO9001双重质量体系认证，建立了完备的质量体系，数据冷热/异地备份，设备定期计量/期间核查，软件审计追踪，为客户提供一体化解决方案和技术服务，支持新药研发、药物申报注册和生产放行。

1.公司采用ISO9001质量控制体系，专业提供以质谱为基础的CRO检测分析服务；

2.获国家CNAS实验室认可，为客户提供符合全球药政法规的药物质量研究服务；

3.业务范围覆盖蛋白质组学、多肽组学、代谢组学、生物药物表征、单细胞分析、单细胞质谱流式、生信云分析以及多组学生物质谱整合分析等；

4.七大质量控制检测平台，满足您一站式服务需求；

5.服务3000+企业，10000+客户的选择；

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